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定氮儀蒸餾器測定蛋白質(zhì)含量的蒸餾過程

來源: http://www.18192.cn/  類別:實(shí)用技術(shù)  更新時間:2015-03-13  閱讀
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定氮儀蒸餾器我們一般也簡單的稱為蒸餾器,是一種可以單獨(dú)使用對樣品進(jìn)行蒸餾或者跟消化爐一起使用用來用來測定蛋白質(zhì)的氮含量的設(shè)備。
 
凱式定氮法測定樣品中蛋白質(zhì)含量一般可以分為四個步驟:消化、蒸餾、吸收、滴定。消化樣品需要用到消化爐,蒸餾則是運(yùn)用定氮儀蒸餾器進(jìn)行蒸餾。
 
凱式定氮法測定蛋白質(zhì)含量的蒸餾過程如下:
 
1.洗滌蒸餾器:用水洗滌干凈定氮儀蒸餾器,在蒸汽發(fā)生器中加入用幾滴硫酸酸化的蒸餾水和幾滴甲基紅指示劑,用這樣的水蒸氣洗滌凱氏定氮儀。約15分鐘后,在冷凝器下端傾斜放好裝有硼酸-指示劑的錐形瓶,繼續(xù)蒸汽洗滌2分鐘,觀察錐形瓶內(nèi)的溶液是否變色,如不變色則證明蒸餾裝置內(nèi)部已洗滌干凈。移走錐形瓶,停止加熱,打開夾子。
 
2.蒸餾器蒸餾過程:取下棒狀玻塞,用吸管吸取消化液,細(xì)心地插到反應(yīng)室小玻璃杯的下方,塞緊棒狀玻塞。將一個含有硼酸和指示劑的錐形瓶放在冷凝器下方,使冷凝器下端浸沒在液體內(nèi)。取30%的氫氧化鈉溶液10ml放入小玻璃杯中,輕提棒狀玻璃塞使之流入反應(yīng)室(為了防止冷凝管倒吸,液體流入反應(yīng)室必須緩慢)。尚未完全流入時,將玻璃塞蓋緊,向玻璃杯中加入蒸餾水約5ml。再輕提玻璃塞,使一半蒸餾水慢慢流入反應(yīng)室,一半留在玻璃杯中作水封。加熱水蒸汽發(fā)生器,沸騰后夾緊夾子,開始蒸餾。氨氣進(jìn)入錐形瓶,瓶中的酸溶液由紫色變成綠色。變色時起記時,再蒸餾5分鐘。移動錐形瓶,使硼酸液面離開冷凝管約1 厘米,并用少量蒸餾水洗滌冷凝管口外面,繼續(xù)蒸餾1分鐘,移開錐形瓶,用表面皿覆蓋錐形瓶。蒸餾完畢后,須將反應(yīng)室洗滌干凈,再繼續(xù)下一個蒸餾操作。待樣品和對照均蒸餾完畢后,同時進(jìn)行滴定。
 
蒸餾是滴定的前提,只有將樣品中的含氮物質(zhì)完全蒸餾出來,才能進(jìn)行滴定,如果定氮儀蒸餾器沒有將含有的化學(xué)物質(zhì)完全蒸餾吸收,那么測出的蛋白質(zhì)結(jié)果將有偏差。
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