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飼料中性洗滌纖維(NDF)和酸性洗滌纖維(ADF)的測定

來源: http://www.18192.cn/  類別:實用技術(shù)  更新時間:2011-01-19  閱讀
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飼料中性洗滌纖維(NDF)和酸性洗滌纖維(ADF)的測定
     采用范氏(Van Soest)的洗滌纖維分析法測定中性洗滌纖維(NDF)和酸性洗滌纖維(ADF)原理:植物性飼料經(jīng)中性洗滌劑煮沸處理,不溶解的殘渣為中性洗滌纖維,主要為細(xì)胞壁成分,其中包括半纖維素、纖維素、木質(zhì)素和硅酸鹽。中性洗滌纖維經(jīng)酸性洗滌劑處理,剩余的殘渣為酸性洗滌纖維,其中包括纖維素、木質(zhì)素和硅酸鹽。酸性洗滌纖維經(jīng)72%硫酸處理后的殘渣為木質(zhì)素和硅酸鹽,從酸性洗滌纖維值中減去72%硫酸處理后的殘渣為飼料的纖維素含量。將72%硫酸處理后的殘渣灰化,在灰化過程中逸出的部分為酸性洗滌木質(zhì)素(ADL)的含量。在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域,或者是食品界,尤其是快速測定時,我們通常不選擇實驗室方法來測定,而是選擇快速測定法,即直接用儀器如纖維測定儀。纖維測定儀利用酸堿消煮法來進(jìn)行測定,有時又叫做粗纖維測定儀,因為測定的物質(zhì)中不僅含有纖維,還含有木質(zhì)素等其他物質(zhì),因此被稱為粗纖維。
     試劑的配制:中性洗滌劑(3%十二烷基硫酸鈉):準(zhǔn)確稱取18.6g乙二胺四乙酸二鈉(EDTA,C10H14O8Na2?2H2O,分析純)和6.8g硼酸鈉(Na2B4O7?10H2O,分析純)放入燒杯中,加入少量蒸餾水,加熱溶解后,再加入30g十二烷基硫酸鈉(C12H25NaO4S,分析純)和10ml乙二醇乙醚(C4H10O2,分析純);再稱取4.56g無水磷酸氫二鈉(Na2HPO4,分析純)置于另一燒杯中,加入少量蒸餾水微微加熱溶解后,倒入前一個燒杯中,在容量瓶中稀釋至1000ml,其中pH值約為6.9~7.1(pH值一般勿需調(diào)整);1N硫酸:量取約27.87ml濃硫酸(分析純,比重1.84,98%),徐徐加入已裝有500ml蒸餾水的燒杯中,冷卻后注入1000ml容量瓶定容,標(biāo)定;酸性洗滌劑(2%十六烷三甲基溴化銨):稱取20g十六烷三甲基溴化銨(CTAB,分析純)溶于1000ml1N硫酸,必要時過濾;
操作步驟:中性洗滌纖維測定.準(zhǔn)確稱取1.0000g樣品(通過40目篩)置于直筒燒杯中,加入100ml中性洗滌劑和數(shù)滴十氫化萘及0.5g無水亞硫酸鈉。將燒杯套上冷凝裝置于電爐上,在5~10min內(nèi)煮沸,并持續(xù)保持微沸60min。煮沸完畢后,取下直筒燒杯,將燒杯中溶液倒入安裝在抽濾瓶上的已知重量的玻璃坩堝中進(jìn)行過濾,將燒杯中的殘渣全部移入,并用沸水沖洗玻璃坩堝與殘渣,直洗至濾液呈中性為止。用20ml丙酮沖洗二次,抽濾。將玻璃坩堝置于105℃烘箱中烘2h后,在干燥器中冷卻30min稱重,直稱至恒重。酸性洗滌纖維測定。準(zhǔn)確稱取1g樣品(通過40目篩)置于直筒燒杯中,加入100ml酸性洗滌劑和數(shù)滴十氫化萘。將燒杯套上冷凝裝置于電爐上,在5~10min內(nèi)煮沸,并持續(xù)保持微沸60min。趁熱用已知重量的玻璃坩堝抽濾,并用沸水反復(fù)沖洗玻璃坩堝及殘渣至濾液呈中性為止。用少量丙酮沖洗殘渣至抽下的丙酮液呈無色為止,并抽凈丙酮。將玻璃坩堝置于105℃烘箱中烘2h后,在干燥器中冷卻30 min稱重,直稱至恒重。酸性洗滌木質(zhì)素和酸不溶灰分(AIA)測定:將酸性洗滌纖維加入72%硫酸,在20℃消化3h后過濾,并沖洗至中性。消化過程中溶解部分為纖維素,不溶解的殘渣為酸性洗滌木質(zhì)素和酸不溶灰分,將殘渣烘干并灼燒灰化后即可得出酸性洗滌木質(zhì)素和酸不溶灰分的含量。
     結(jié)果計算:中性洗滌纖維含量的計算:NDF(%)=(W1-W2)/W×100;式中:W1—玻璃坩堝和NDF重(g);W2—玻璃坩堝重(g);W—試樣重(g);酸性洗滌纖維含量的計算:ADF(%)=(G1-G2)/G×100;式中:G1—玻璃坩堝和ADF重(g);G2—玻璃坩堝重(g);W—試樣重(g)。半纖維素含量的計算:半纖維素(%)=NDF(%)-ADF(%);纖維素含量的計算:纖維素=ADF(%)-經(jīng)72%硫酸處理后的殘渣(%);酸性洗滌木質(zhì)素(ADL)含量的計算:ADL(%)=殘渣(%)-灰分(硅酸鹽,%)。
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