用油重法測定脂肪含量過程分析
用油重法測定脂肪含量過程分析
油重法(或抽提瓶增重法):原理：試樣在抽提管中反復(fù)抽提, 直到脂肪抽提干凈, 抽提瓶的增重即為樣品所含粗脂肪重量。材料方法：索氏脂肪提取器、分析天平、電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱、水浴鍋、乙醚等。索氏提取器應(yīng)干燥無水: 抽提瓶在105±2℃烘箱中烘干60min, 干燥器中冷卻30min, 再烘干30min, 同樣冷卻稱重, 兩次質(zhì)量之差小于0.0008g 為恒重。稱取試樣1～5g(準(zhǔn)確至0.0002g), 置于濾紙筒中或用濾紙包好, 濾紙包應(yīng)低于提取器虹吸管的高度, 并應(yīng)全部浸泡于乙醚中, 將濾紙包放人抽提管, 在抽提瓶中加無水乙醚, 在60～75℃的水浴加熱, 70 次為抽提終點[或以抽提管流出的乙醚揮發(fā)后不留下油跡為抽提終點]。取出試樣, 仍用原提取器回收乙醚直至抽提瓶內(nèi)的乙醚被全部收完, 取下抽提瓶, 在水浴鍋上蒸除殘留乙醚。擦凈外壁, 將抽提瓶放人105±2℃烘箱中烘干120min, 燥器中冷卻30min, 稱重,再烘干30min, 同樣冷卻稱重, 兩次質(zhì)量差小于0.001g 為恒重, 抽提瓶前后重量之差為粗脂肪含量。
優(yōu)點：樣品含有的粗脂肪, 完全被抽提瓶回收,可以進(jìn)一步分析樣品脂肪酸組成, 及脂肪酸品質(zhì)；整個過程在樣品絕干狀態(tài)下進(jìn)行, 實驗結(jié)果產(chǎn)生誤差的機(jī)會小。缺點：長時間烘干, 抽提瓶會在恒重之后又增重, 主要原因是粗脂肪有可能在抽提瓶發(fā)生氧化反應(yīng)而使重量增加, 粗脂肪品質(zhì)發(fā)生變化；抽提瓶重量、體積均較大, 在分析天平上稱量時有一定的困難；實驗一次想進(jìn)行多個樣品, 或做多組重復(fù)時, 需要的提取器相應(yīng)增多, 利于同時進(jìn)行, 在實驗性教學(xué)上不方便；時間長, 危險大, 整個實驗完成大概要8h左右。乙醚有毒, 易揮發(fā), 大量吸入頭暈、眼酸、腹瀉。有些情況下還可能燃燒。
由上可見，油重法也可以改裝成脂肪測定儀法。不管是原理還是試劑、過程，都跟用儀器測定一樣。而脂肪測定儀測出的物質(zhì)，不但含有脂肪，還同時含有脂肪酸等混合物，因此該儀器也被稱為粗脂肪測定儀。不過用脂肪測定儀來測定脂肪含量時，更加方便快捷，因為很多步驟，都可以由儀器自動完成，而不需要人工操作。脂肪測定儀主要有加熱浸泡抽提，溶劑回收和冷卻三大部分組成。操作時可以根據(jù)試劑沸點和環(huán)境溫度不同而調(diào)節(jié)加熱溫度，試樣在抽提過程反復(fù)浸泡及抽提、從而達(dá)到快速測定目的。就外觀而言，脂肪測定儀與纖維測定儀類似，粗纖維測定儀的原理是酸堿消煮法。
